ECL化学化学发光底物(超敏)的操作步骤
来源于:开云体官网入口·(中国),浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间:2023/3/17 16:26:00
ECL化学化学发光底物(超敏)可为使用辣根过氧化物酶(HRP)偶联物的免疫印迹实验提供明亮的信号和低皮克级检测灵敏度。 该ECL底物能够兼容各种膜、封闭液和宽范围抗体稀释液,以出色性能、通用性和高性价比,满足用户的免疫印迹应用需求。
操作步骤:
1、执行常规SDS-PAGE、转模和Western Blot步骤。 注意用HRP标记lgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。
2、Western Blot最后一次洗模的同时配置发光工作液:分别取等体积的A液和B液,放入干净容器中混合(注意吸取A液和B液的吸头一定要分开,避免试剂污染)。 建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度有所降低。
3、Western Blot最后一次洗膜后,用镊子将膜取出,用滤纸吸去多余的洗涤液(切勿接触膜的蛋白面),然后置于一洁净保鲜膜上或塑料容器内。
4、根据膜的大小按比例滴加配置好的ECL工作液到膜上,确保工作液均匀覆盖在膜上,放置1-3分钟。
5、取膜,用滤纸吸去多余的液体,将膜放在两篇保鲜膜中间,随后进行压片检测或化学发光成像仪检测。
6、压片检测:将膜固定于X光胶片暗盒内(注意蛋白面向上)。 暗房内压X光胶片,分别曝光不同的时间,如数秒到数分钟,显影冲洗。
7、化学发光成像仪检测:将膜放置到化学发光成像仪内,参考仪器说明书进行检测。 注
意事项: 建议第一次曝光60秒,之后可调整曝光时间以达到最佳结果。 化学发光反应在底物孵育后的前5-30分钟期间是最强烈的,这一反
相关科研教学
-
2024-07-25
-
2024-07-24
-
2024-07-23
-
2024-07-22
-
2024-07-19
热门文章
- ▪ 端午放心吃!粽子抽检全都合格
- ▪ 联硕生物:美媒:孩子最可能11岁时尝试大麻!
- ▪ ELISA试剂盒组成与常见ELISA试剂盒分类
- ▪ 联硕生物:烧烤食物吃多了会患癌嘛?
- ▪ ELISA操作要点:ELISA实验18条通用规则
- ▪ 联硕生物:股神”巴菲特确认收购医疗责任承保公司
- ▪ ELISA试剂盒免费代测服务
- ▪ 联硕生物:秋天我们为什么会莫名其妙心情不好?
- ▪ 《Science stars of China》共选出十位中国科学之星!
- ▪ 联硕生物:美国总统奥巴马计划以后投资“生物医学”领域
- ▪ 联硕生物:“超级细菌”的耐药性基因可遗传是真的吗?
- ▪ 联硕生物:小鼠是如何做到活到140岁的
- ▪ 联硕生物:洗衣机影响人类生殖力下降吗?