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大鼠胰岛素细胞的应用
来源于:开云体官网入口·(中国),浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间:2023/1/3 9:12:00

背景

大鼠胰岛素细胞源自大鼠胰岛组织,胰岛素阳性,可合成胰岛素原I和II,可用于胰岛β细胞功能研究。

胰腺的内分泌部分,是分散在胰腺中的不规则的细胞群。胰岛至少有三种细胞:A(或a2)细胞分泌胰高血糖素;B(或β)细胞分泌胰岛素;近来又发现一种细胞,称为D(或δ或α1)细胞,它在正常情况下分泌生长激素释放抑制激素。D细胞增生或发生肿瘤时,分泌大量胃泌素,称为胃泌素瘤。可引起胃酸分泌过多的消化性溃疡。胰岛这些细胞紧靠在毛细血管上,所分泌的激素,通过毛细血管壁渗入血液内,有调节糖代谢的作用。

B细胞(β细胞),约占胰岛细胞的60%~80%,分泌胰岛素,胰岛素可以降低血糖。缺乏胰岛B细胞将导致糖尿病的发生。

A细胞(α细胞),约占胰岛细胞的24%~40%,分泌胰高血糖素,胰高血糖素作用同胰岛素相反,可增高血糖。

D细胞(δ细胞),约占胰岛细胞总数的6%~15%,分泌生长抑素。

胰高血糖素是一种由胰岛细胞分泌的蛋白质激素,它与胰岛素一起发挥作用来调节血糖的水平。当血糖(葡萄糖)浓度低时,胰高血糖素刺激肝脏将储存的糖原转化为葡萄糖,并立即释放到血流中,以此来升高血糖的浓度。胰高血糖素还可以增加肝脏中蛋白质生成葡萄糖的速率。

应用

探讨mi R-126在原代分离培养的正常SD大鼠胰岛β细胞胰岛素信号通路中的调控作用及其对胰岛β细胞凋亡的影响。

方法:以原代分离培养的正常SD大鼠胰岛β细胞为模型,转染合成的mi R-126模拟物(mi R-126 mimic)或mi R-126抑制剂(mi R-126 inhibitor),干预mi R-126的表达,并用流式细胞术检测转染效率和细胞凋亡率。

转染后的大鼠胰岛β细胞用胰岛素(100nm)刺激12小时,提取细胞的总RNA,用荧光定量PCR技术以U6及β-actin为内参基因检测mi R-126、IRS-1、IRS-2的相对表达量;提取细胞总蛋白进行BCA蛋白测定,用western Blot技术检测IRS-1/2,Akt,PIK3R2蛋白表达量。

结果:流式细胞术检测显示:mi R-126 mimics、mi R-126 inhibitor、negative control转染效率较高;mi R-126 mimic组大鼠胰岛β细胞凋亡数显著高于NC组和mi R-126inhibitor组(P<0.05);荧光定量PCR检测结果显示:mi R-126 mimic组大鼠胰岛β细胞IRS-1/2相对表达量较NC组和mi R-126 inhibitor组显著降低(P<0.05);Western blot结果显示:mi R-126 mimic组大鼠胰岛β细胞IRS-1/2、Akt、P-Akt及PIK3R2蛋白表显著受到抑制。

结论:过表达mi R-126可能通过调控胰岛素信号通路中IRS-1/2、Akt、P-Akt及PIK3R2表达参与胰岛素抵抗。2.过表达mi R-126可诱导大鼠胰岛β细胞凋亡。

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