一、什么是琼脂糖凝胶
琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂糖,琼脂糖的熔点在6265°C之间,融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的分离。
二、琼脂糖凝胶用途
琼脂糖凝胶可以用于生化、医学研究领域。在生化上可作为凝胶电泳的支持物和亲和层析的载体,在医学上还可用于研究病毒嗜菌体、细菌、临床检验、生化分析、蛋白质、核酸、抗原、抗体,以及多糖的分离、提纯及药物的制备。
做一个完美的琼脂糖凝胶图,缓冲液的选择很重要。
三、如何选择合适的缓冲液
最常用的缓冲液是TAE缓冲液和TBE缓冲液。一般来说,实验室通常选择这两者中的其中一种缓冲液,所以了解两个缓冲液之间的区别对您的实验是非常重要的,那么如何区分这两个缓冲液呢:
1.TAE是Tris-乙酸,缓冲容量小,但是溶解度大,易于储存;TBE是Tris-硼酸,缓冲容量大,但是溶解度小,不易长期储存,易产生沉淀。
2.TAE适合较大的DNA片段,而TBE适合较小的DNA片段。
3.如果凝胶运行时间长,建议使用TBE。如果您计划将DNA用于任何下游应用,则建议您使用TBE。
4.TAE易于储存,更加稳定,而TBE几周内会出现沉淀。
四、新鲜的缓冲液
选择好缓冲液后,准备一份从未使用过的缓冲,新鲜的小份缓冲液,可以储存5倍或10倍的缓冲液等,但使用前一定要稀释。使用新鲜的缓冲液,用于制备凝胶.实验结果会变得更清晰,条带更均匀。
五、缓冲液的温度把控
正所谓慢工出细活,制作活琼脂糖凝胶一定要有耐心。凝胶运行电泳电压应在75V以下,缓冲液不要过热。缓冲液的温度是是造成条带不清晰、不均匀的主要原因之一。为了防止缓冲液出现过热的情况,在运行前,可以将缓冲液或凝胶冷却,或在冷藏室运行凝胶。
-
2024-07-25
-
2024-07-24
-
2024-07-23
-
2024-07-22
-
2024-07-19
- ▪ 端午放心吃!粽子抽检全都合格
- ▪ 联硕生物:美媒:孩子最可能11岁时尝试大麻!
- ▪ ELISA试剂盒组成与常见ELISA试剂盒分类
- ▪ 联硕生物:烧烤食物吃多了会患癌嘛?
- ▪ ELISA操作要点:ELISA实验18条通用规则
- ▪ 联硕生物:股神”巴菲特确认收购医疗责任承保公司
- ▪ ELISA试剂盒免费代测服务
- ▪ 联硕生物:秋天我们为什么会莫名其妙心情不好?
- ▪ 《Science stars of China》共选出十位中国科学之星!
- ▪ 联硕生物:美国总统奥巴马计划以后投资“生物医学”领域
- ▪ 联硕生物:“超级细菌”的耐药性基因可遗传是真的吗?
- ▪ 联硕生物:小鼠是如何做到活到140岁的
- ▪ 联硕生物:洗衣机影响人类生殖力下降吗?