细胞和组织的体外培养已成为生命研究和实践的必不可少内容。培养的细胞类型繁多,从病毒到细菌和真菌,从人体细胞到动物细胞和植物细胞。一些细胞和组织可在悬浮状态下生长,但相当一部分哺乳动物细胞需要表面贴壁。因此,用于提供细胞体外培养环境的培养瓶、培养板和培养皿除了具有良好的透明度和无毒、无菌外,还需经表面改性处理使之能够贴壁、分裂和生长。
细胞培养瓶的作用:
细胞培养瓶,顾名思义就是用来培养细胞的。根据材质可以分为玻璃的和塑料的,底部形状有正方形、长方形、三角形等,根据瓶子容积有5至500ml供选择。另外,表面经过特殊改性处理后,可以让细胞更好的进行贴壁培养,这样根据细胞贴壁面积又可以分为25~175cm2多种。
国产的细胞培养瓶一般盖子都是封闭的,不带内垫,常用于密闭培养,可保证其密闭性;进口的培养瓶的盖子样式比较多:密闭盖、聚酯盖、透气盖、隔垫盖等。密闭盖的性能和国产的是相同的,聚酯盖常用于开放培养,只需轻轻旋松瓶盖便可保证瓶内气体与环境中气体的交换。透气盖是在瓶盖中加了0.2μm疏水滤膜,提供无菌气体交换,减少污染的风险。常用于开放培养,推荐用于CO2培养箱培养,尤其适用于需要长期培养的实验。隔垫盖是在隔垫上带有预切割口,这样可以使吸嘴(或者5ml以下规格的移液管)穿插隔垫进行加液、吸液或者收获细胞,减少污染的机会,维持培养瓶封闭无菌的环境。
细胞培养瓶的分类:
培养瓶的瓶颈也有多种样式,有直颈、斜颈、角度颈、三角形、矩形。
直颈:可以减少培养基因晃动而流到瓶盖里;
斜颈:易于倾注,移液管或者细胞刮容易进入瓶体;
角度颈:移液管或者细胞刮易于进入瓶身,并且可减少培养基因晃动而流到瓶盖;
三角形:移液管或细胞刮更易达到瓶角,宽底增加稳定性;
矩形:斜颈的矩形培养瓶瓶底至瓶颈是一个坡度设计,易于倾注,移液管或者细胞刮容易进入瓶体,大部分斜颈瓶都有一个裙边以增加稳定性。直颈和角度颈的矩形培养瓶整个瓶底都是培养面,节省空间并减少培养基因晃动而流到瓶盖。
按细胞对产品的贴壁要求分为三类:
普通型适合细胞和组织的悬浮培养;
标准型具有良好的细胞贴壁性能,适用于细胞的贴壁生长;
专用型表面含有含氮官能团,能促进某些特殊细胞(如肿瘤细胞)的贴壁、生长和分化。