夹心法分为双抗体夹心法和双抗原夹心法。

双抗体夹心法：此方法常用于检测抗原。将抗体固定在固相载体上，加入待测抗原，与抗体特异性结合，再加入酶标抗体检测，并利用底物显色，即可测定总靶标蛋白的含量。

双抗原夹心法：反应模式与双抗体夹心法类似，用固相抗原和酶标特异性抗原，分别代替固相抗体和酶标特异性抗体，即可测定样品中的抗体。

夹心法ELISA的显色结果与待检抗原（或抗体）的量成正比。

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