蛋白酶的特性以及作用


什么是蛋白酶K？
蛋白酶K，是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。蛋白酶K的应用比较广泛。包括制备脉冲电泳的染色体 DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。


蛋白酶K的主要作用是什么？
蛋白酶K的主要作用：蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理，它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用，以增加探针与靶核酸结合的机会，提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时，都会对细胞的结构有一定的破坏，导致组织切片的脱落，细胞核 的消失，从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用，解决上述出现的问题，并能达到理想的染色效果。


蛋白酶K在DNA提取中的作用是什么？
蛋白酶K的作用是使膜蛋白降解,使与DNA结合的蛋白质降解,使DNA充分游离.


蛋白酶K在核酸提取中的应用有哪些？
蛋白酶K可用于各种蛋白质的消化，包括制备脉冲电泳的染色体DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K在提取核酸中的应用涉及到食源性疾病预防、农业病虫害的防治、法医学基因鉴定比对和分子生物学试验研究等多个领域。应用对象包括原核生物、人体血样及组织、动植物组织、寄生虫、微生物等类别。蛋白酶K的应用条件，如工作浓度、缓冲液种类及浓度、处理时间、处理温度等条件依据样品的不同而变化。