A. 预制凝胶法
1. 将GelRed(10,000X)原液以1:10,000比例加入到熔化的凝胶中,混合均匀。(GelRed可在加热后的凝胶冷却至45℃左右时添加。)
2. 倒胶,室温放置等待凝固。
3. 按常规方法上样电泳。
4. 观察染色凝胶使用标准的透照仪(302或312 nm),成像使用溴化乙锭滤光器,SYBR或GelStar滤光器凝胶成像也可以得到很好的结果。
5. 未使用的含有GelRed的预制凝胶可以重新熔化做胶,为保证最佳荧光信号,酌情添加适量染料。不建议长期储存含有GelRed熔化形式的琼脂糖。含有GelRed的预制胶可以保存在4℃供下次使用。
B. 泡染法
1. 按照常规方法进行凝胶电泳。
2. 稀释 GelRed :用水将10,000X储备液稀释3300倍制成3X染色液。通常情况下50mL染色液足够染一小块凝胶。(注:染色液中含有0.1 M NaCl能增强灵敏度,但可能会促使凝胶染色出现沉淀。)
3. 把凝胶放于合适的容器,如聚丙烯染色托盘中。添加足量的3X染色液至浸没凝胶。
4. 室温缓慢振荡染色30min。注:最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同略有不同。对于含3.5-10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min至1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
5. 不必脱色,必要的话可以水洗以降低背景值。
6. 使用标准的透照仪(302或312 nm)观察染色凝胶,成像使用溴化乙锭滤光器,SYBR 或 GelStar滤光器凝胶成像也可以得到很好的结果。
7. 染色液可重复使用2-3次,室温下避光保存。
-
2024-07-25
-
2024-07-24
-
2024-07-23
-
2024-07-22
-
2024-07-19
- ▪ 端午放心吃!粽子抽检全都合格
- ▪ 联硕生物:美媒:孩子最可能11岁时尝试大麻!
- ▪ ELISA试剂盒组成与常见ELISA试剂盒分类
- ▪ 联硕生物:烧烤食物吃多了会患癌嘛?
- ▪ ELISA操作要点:ELISA实验18条通用规则
- ▪ 联硕生物:股神”巴菲特确认收购医疗责任承保公司
- ▪ ELISA试剂盒免费代测服务
- ▪ 联硕生物:秋天我们为什么会莫名其妙心情不好?
- ▪ 《Science stars of China》共选出十位中国科学之星!
- ▪ 联硕生物:美国总统奥巴马计划以后投资“生物医学”领域
- ▪ 联硕生物:“超级细菌”的耐药性基因可遗传是真的吗?
- ▪ 联硕生物:小鼠是如何做到活到140岁的
- ▪ 联硕生物:洗衣机影响人类生殖力下降吗?