培养皿的清洁
1.浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡,软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗,然后用5%盐酸浸泡过夜;用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后应立即浸入清水中备刷洗。
2.刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中,用软毛刷反复刷洗。不要留死角,并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干,备浸酸。
3.浸酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中,又称酸液,通过酸液的强氧化作用清除器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时,一般过夜或更长。放取器皿要小心。
4.冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗,浸酸后器皿是否冲洗的干净,直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿,每件器皿至少要反复“注水-倒空”15次以上,最后用重蒸水洗2-3次,晾干或烘干后包装备用。
5.一次性使用的塑料培养皿一般出厂时就已射线灭菌或者化学灭菌。
培养皿的分类
1.根据培养皿用途的不同可分为细胞培养皿和细菌培养皿。
2.根据制造材料的不同分为塑料培养皿和玻璃培养皿,但进口培养皿和一次性培养皿都是塑料材料。
3.根据大小的不同通常可分为直径为35mm,60mm,90mm。150mm培养皿。
4.根据分隔的不同又可分为2分隔培养皿,3分隔培养皿等。
5.培养皿材质基本上分为两类,主要为塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,适合实验室接种、划线、分离细菌的操作,可以用于植物材料的培养。
使用注意事宜
1.使用前经过清洁消毒,培养皿清洁与否对工作影响较大,可影响培养基的酸碱度,若有某些化学药品的存在,会抑制细菌生长。
2.新购的培养皿应先用热水冲洗,再置于质量分数为1%或2%的盐酸溶液中浸泡数小时,使游离碱性物质除去,再用蒸馏水冲洗2次。
3.若要培养细菌,再用高压蒸气(一般6.8*10的5次方Pa高压蒸气),120℃的温度下30min灭菌,置室温中干燥,或用干热灭菌,就是将培养皿置于烘箱内,温度控制在120℃左右的情况下维持2h,即可杀死细菌的胞牙。
4.经过消毒的培养皿才能接种培养使用。
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