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如何用PBS缓冲液清洗细胞?
来源于:开云体官网入口·(中国),浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间:2023/6/29 17:14:00

一:取材

撕取洋葱鳞茎内表皮2~3mm2置于载玻片上,用吸管加6mmoI的PBS缓冲液两滴,使材料充分浸入到液体中,处理约5分钟。

二:去垢处理

用吸水纸吸净浸泡材料的PBS缓冲液,加2~3滴37°C预温的去垢剂1%TritonX-100,使液体充分浸泡材料,并立即放入37C水浴锅中处理15分钟。

三:冲洗

吸去 1%Triton,用6mmol的PBS缓冲液轻轻冲洗,反复两至三次。

四:固定

用吸水纸吸尽PBS缓冲液,加2滴3%戊二醛固定约20分钟。

五:冲洗

吸去3%戊二醛固定液,用6mmol的PBS缓冲液轻轻冲洗,反复两至三次。

六:染色

吸去PBS缓冲液,滴几滴0.2%考马斯亮蓝R250染料,染色约10分钟。

七:制片

加盖盖玻片,用吸水纸吸去多余染料。

八:观察

观察将制好的玻片置于低倍镜下,可见到规则排列的多边形洋葱表皮细胞轮廓,在细胞质中可见到被染成蓝色的粗细不等的分枝状或点状结构,这就是细胞骨架。然后转高倍镜继续观察,调节细准焦螺旋可见到细胞骨架的立体结构。

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