细胞常规培养是在细胞房中进行，在超净工作台或生物安全柜中，把细胞处理好，根据需要加入细胞培养基，放入细胞培养瓶/皿或细胞培养板中，再放到带有5% CO2 的37℃恒温培养箱中培养。细胞就像花花草草，尤其是细胞株基本每天都要观察、打理的哦！

培养的细胞从哪里来？

1.细胞株

简单说就是买的或送的。

2.原代细胞

组织或血液中提取的。一般细胞株可以连续传代，而原代细胞养着养着就挂了。

培养细胞的生长方式有哪些？

1.贴壁生长

必须贴附于支持物表面才能生长。见于各种肿瘤细胞等。（你把培养皿或培养瓶底朝上，细胞也不会掉下来。

2.悬浮生长

于悬浮状态下即可生长，不需要贴附于支持物表面。见于各种造血系统肿瘤细胞等。

细胞完全培养基的组成有哪些？

基础培养基：80-95%

血清：5-20%

碳酸氢钠：2.0g/L

青、链霉素：各200单位/毫升

细胞传代

何为细胞传代？

细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿即为细胞传代。

为什么要传代？

简单说就是“孩子”长大了，要“分家”！

细胞株在培养过程中数量会不断增多，但是培养细胞的细胞瓶/皿的空间有限，就会导致细胞之间接触过于紧密，会使得细胞增殖收到抑制，所以我们必须把其中一部分细胞转移到别的细胞瓶/皿，让细胞有足够的生长空间。

什么时候传代？

观察培养基是否正常，细胞状态如何，细胞密度如何，决定是否传代。如培养基变黄，细胞长成致密单层等情况。

传代方法有哪些？

1.悬浮生长细胞传代

1)离心法传代：离心1000转/分去上清，沉淀物加新培养液后再混匀传代。

2)直接传代法：悬浮细胞沉淀在瓶壁上，将上清培养液去除1/2~2/3，然后用吸管直接吹打形成细胞悬液再传代。

2.半悬浮生长细胞传代

此类细胞部分呈现贴壁生长现象，但是贴壁不牢，可用直接吹打使细胞从瓶壁上脱落下来，进行传代。

3.贴壁生长细胞传代

采用胰酶消化法传代。常用的消化液有0.25%的胰蛋白酶液。