siRNA（小干扰RNA）是一种新型的基因治疗工具，是由21-25个核苷酸组成的双链短RNA分子，能够特异性地诱导靶基因的沉默，进而抑制蛋白的表达。siRNA最初由Andrew Fire和Craig Melo在1998年提出，之后在2001年被证明可以特异性地抑制哺乳动物细胞中的靶基因表达。这一发现由David Baulcombe团队在《科学》杂志上发表，成为当年全球十大科学进展之首，他的团队并于2006年荣膺了诺贝尔生理学或医学奖。

siRNA的抑制作用是通过其与AGO蛋白组装成的RNA诱导沉默复合体（RISC）发挥的。一条链被降解，另一条链则与靶基因的mRNA互补配对，使其被切割降解，从而达到治疗相关疾病的目的。与传统的基因治疗相比，siRNA具有高度特异性、快速、可逆性等优点，可以应用于各种真核生物的基因功能研究，药靶发现及药物筛选中广泛应用。例如siRNA靶向恶性肿瘤的基因可以通过局部或系统性给药来治疗肿瘤，病毒感染和遗传疾病也都有涉及。

为了方便使用，常规siRNA产品以冻干粉形式提供，可以直接用于各种细胞RNAi实验。科研人员可以根据需要设计特定靶点，覆盖人、小鼠、大鼠全基因组的所有基因。同时，通过对siRNA进行化学修饰，可以提高其在体内实验中的高效性、特异性和稳定性。

RNA干扰（RNAi）是一种广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程，常常被用作基因沉默（基因干扰）的工具之一。siRNA作为RNAi的一种形式，具有非常广阔的应用前景。未来，siRNA还将继续发挥其独特的优势，成为治疗相关疾病的新趋势。

siRNA转染实验介绍

01- siRNA储存

常规化学合成的siRNA序列为21～23nt的双链小分子RNA，为冻干粉形式的即用型试剂 ，在常温不溶解的情况下可以保存至少1个月时间，放置于-20℃～-80℃低温环境中，冻干粉可以稳定保存一年。

02- 转染试剂储存

4℃保存，不可冷冻。

03-体外转染操作流程：

第一步、接种细胞：建议提前一天接种细胞，接种数量参考下方推荐量。

第二步、 转染复合液配制：

● siRNA稀释液配制：siRNA以水稀释至140 μg/mL。

● siRNA转染复合液配制：取无菌离心管，加入2μL siRNA稀释液，加入LipidnanoTM Super RNAi转染试剂A液14μL，吹打混匀，加入LipidnanoTM Super RNAi转染试剂B液4μL，混合均匀，室温放置5min，加培养液180μL，吹打混匀。

第三步、细胞加样：按下方推荐量将配制好的siRNA转染复合液加入各细胞孔中，摇动培养板，轻轻混匀。

第四步、细胞培养：37 ℃，5% CO2 培养箱培养，直至发挥干扰作用。建议24~48h测定mRNA水平、48~72h测定蛋白水平。